生化药品制造工职业技能等级证书 练习卷

1在枯草芽孢杆菌发酵生产某胞外酶时，发酵液经离心去除菌体后，上清液需进行硫酸铵盐析，盐析操作中通常将硫酸铵缓慢加入并持续搅拌，其主要目的是

1. A. 防止局部盐浓度过高导致目标蛋白变性失活
2. B. 提高硫酸铵在溶液中的溶解度以缩短盐析时间
3. C. 使菌体碎片同步沉淀以简化后续离心步骤
4. D. 促进目标蛋白与杂蛋白形成共沉淀以提高收率

2在冻干制剂生产中，某生化药品溶液经预冻后进行升华干燥，若制品出现融化回缩现象，首先应检查的操作参数是

1. A. 冻干箱内真空度是否低于设定值
2. B. 搁板温度是否超过制品共晶点
3. C. 冷阱温度是否高于-40℃
4. D. 后箱压力是否高于箱内压力

3在青霉素发酵过程中，补加葡萄糖前需要重点确认的工艺参数是

1. A. 发酵液pH值与残糖浓度
2. B. 罐内搅拌电机电流
3. C. 空气过滤器压差
4. D. 冷却水回水温度

4某抗生素发酵单位低于历史水平，排查发现发酵罐蛇管有轻微渗漏，冷却水进入罐内，最先受影响的参数是

1. A. 发酵液体积与稀释速率
2. B. 罐压与通气比
3. C. 搅拌功率与转速
4. D. 接种龄与接种量

5离子交换层析纯化某生化药品时，操作工用提高洗脱液盐浓度的方式把目标产物洗下，这一操作依据的主要原理是

1. A. 盐离子与目标产物竞争树脂上的带电基团
2. B. 高盐使目标产物溶解度下降而析出
3. C. 盐浓度升高改变了树脂的孔径大小
4. D. 高盐使目标产物电荷完全消失

6某操作工在结晶工序中用降温方式使生化药品从溶液中析出，发现晶体细小且含杂质较多，若要改善晶体质量，比较合理的调整方向是

1. A. 适当减慢降温速率并控制过饱和度
2. B. 加快降温速率以缩短结晶时间
3. C. 提高搅拌转速使晶体充分破碎
4. D. 减少晶种加入量或不加晶种

7某批次发酵液在提取工段进行离心分离时，上清液仍明显浑浊，操作人员下一步最合理的处置是

1. A. 提高离心机转速后直接进入下一批
2. B. 检查离心机进料流量是否超过额定值
3. C. 向发酵液中补加消泡剂再离心
4. D. 将上清液直接转入层析柱上样

8在抗生素发酵生产中，接种后菌体进入对数生长期时，为维持溶氧水平，通常采取的操作是

1. A. 提高搅拌转速并适当增大通气量
2. B. 降低罐压以减少泡沫产生
3. C. 减少补料量以降低菌体耗氧
4. D. 将罐温下调至菌体最低生长温度

9在结晶操作中，将溶液缓慢降温并维持适度搅拌，与快速降温相比，其主要优点是

1. A. 可获得粒度较大且分布较均匀的晶体
2. B. 可显著提高目标产物的最终收率
3. C. 可完全避免晶体中包裹母液杂质
4. D. 可省去后续的过滤与洗涤工序

10在基因工程菌发酵生产中，诱导阶段常用的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）与乳糖相比，其主要优势是什么

1. A. 不被菌体代谢且诱导强度稳定可控
2. B. 能被菌体代谢从而降低生产成本
3. C. 对菌体生长无任何抑制作用
4. D. 诱导后无需控制温度即可高效表达

11发酵罐实消结束后，操作工准备接无菌空气降温，此时罐内维持正压的最主要目的是什么

1. A. 防止罐内培养基因缺氧而染菌
2. B. 防止外界带菌空气倒吸入罐内
3. C. 防止罐内蒸汽冷凝水回流过多
4. D. 防止罐压过高导致安全阀起跳

12洁净区操作人员在灌装过程中发现手套表面有微小破损，正确的处置方式是

1. A. 立即用酒精棉擦拭破口后继续操作
2. B. 在破损处再戴一副手套继续操作
3. C. 立即退出洁净区更换手套并按规定重新消毒
4. D. 坚持到本班结束再统一更换手套

13离心分离菌体时，若发现清液中有大量菌体流失，而设备转速和进料流量均未改变，最应先检查的是哪一项？

1. A. 转鼓内是否积存大量固相
2. B. 进料管是否出现堵塞
3. C. 冷却水温度是否偏低
4. D. 排渣周期是否被人为缩短

14某批纯化后的生化药品溶液经除菌过滤后需灌装，若灌装过程中出现装量差异增大，首先应排查的环节是？

1. A. 除菌滤芯是否发生堵塞
2. B. 灌装泵的计量系统是否异常
3. C. 料液储罐的温度是否偏低
4. D. 洁净区压差是否出现波动

15离子交换层析中，目标蛋白在pH低于其等电点时带正电荷，应优先选用

1. A. 阳离子交换树脂
2. B. 阴离子交换树脂
3. C. 葡聚糖凝胶过滤介质
4. D. 疏水相互作用层析介质

16发酵过程中溶氧电极读数突然降至接近零，而罐压和通气量正常，最先应检查

1. A. 电极膜是否破损或电解液耗尽
2. B. 菌体是否进入衰亡期
3. C. 培养基是否被污染
4. D. 搅拌电机是否反转

17冻干过程中制品出现底部融化而顶部仍冻结的现象，最可能的原因是

1. A. 预冻速率过快导致冰晶细小
2. B. 升华阶段搁板温度设定偏高
3. C. 一次干燥时真空度过低
4. D. 制品装量过少导致传热过快

18某批次青霉素发酵过程中，操作工发现发酵液pH持续下降且糖耗速率明显变慢，下一步最合理的处置是

1. A. 适当补加碳源并调节pH
2. B. 立即升温至35℃促进代谢
3. C. 加大通气量并停止补料
4. D. 放罐并送下游提取

19某操作工在提取纯化生化药品时，涉及有机溶媒的使用，下列做法中符合安全与工艺要求的有（多选）

1. A. 在通风良好的区域操作并接地防静电
2. B. 密闭储存溶媒并远离火源
3. C. 用敞口容器在明火旁加热溶媒
4. D. 将废溶媒直接倒入下水道
5. E. 操作时佩戴防护手套和护目镜

20冻干制剂生产中，制品在升华干燥阶段出现崩解、喷瓶，最可能的原因是

1. A. 预冻速率过快导致冰晶细小
2. B. 升华阶段搁板温度超过共晶点
3. C. 解析干燥阶段真空度过高
4. D. 冻干箱内氮气回充过早

21在抗生素发酵生产中，发酵液经离心除去菌体后得到的滤液，下一步最常采用的提取方法是

1. A. 溶剂萃取法
2. B. 离子交换法
3. C. 盐析沉淀法
4. D. 凝胶过滤法

22某批冻干粉针剂在冻干过程中出现瓶内产品部分融化回缩，最可能的原因是

1. A. 一次干燥阶段搁板温度超过产品共晶点
2. B. 二次干燥阶段真空度过高
3. C. 预冻阶段降温速率过快
4. D. 冻干箱内氮气回充过早

23某厂采用离子交换法提取庆大霉素，上柱后先用水洗，再用稀氨水洗脱。若上柱流速过快，最可能出现的后果是

1. A. 目标产物尚未充分吸附即随流出液流失
2. B. 树脂骨架被高速液流机械破碎
3. C. 氨水洗脱峰变窄导致产物浓度过高
4. D. 树脂交换容量因流速升高而增大

24某冻干制剂完成冻干后压塞出箱，发现部分瓶内制品上层有蜂窝状结构，下层正常，操作记录显示升华阶段搁板升温速率较快，该现象最可能的原因是

1. A. 预冻速率过快形成细小冰晶
2. B. 升华阶段供热过快导致冰升华与逸出不平衡
3. C. 冷阱温度过高使水蒸气未被充分捕集
4. D. 冻干箱真空度过高使冰直接融化

25离子交换层析上样前，缓冲液pH应控制的原则是使目标产物所带电荷与交换剂相反，同时还要满足的条件是

1. A. 使目标产物带电量尽可能大且稳定
2. B. 使杂蛋白带电量尽可能小
3. C. 使缓冲液离子强度尽可能高
4. D. 使缓冲液温度尽可能接近室温

26发酵过程中补料速率过快导致代谢副产物积累，操作工拟调整补料策略，较合理的做法是

1. A. 维持补料速率并提高搅拌转速
2. B. 将补料方式改为指数流加并按溶氧反馈调节
3. C. 暂停补料至副产物被菌体重新利用
4. D. 提高发酵温度以加快副产物代谢

27离子交换层析纯化某碱性蛋白时，洗脱液pH应选择的原则是

1. A. 高于蛋白等电点使蛋白带负电
2. B. 低于蛋白等电点使蛋白带正电
3. C. 等于蛋白等电点使蛋白不带电
4. D. 远离蛋白等电点使蛋白变性沉淀

28在重组人胰岛素大肠杆菌发酵中，采用补料分批培养时，补料速率的主要控制依据是

1. A. 发酵罐内溶解氧浓度和pH的联动趋势
2. B. 发酵液体积是否达到罐体容积上限
3. C. 发酵罐搅拌电机的额定电流值
4. D. 发酵液的颜色由浅变深的速度

29在生物反应器操作中，采用机械搅拌式发酵罐培养丝状真菌时，搅拌桨叶尖端线速度过高最可能造成的影响是

1. A. 菌丝体被剪切破坏导致产量下降
2. B. 发酵液溶氧系数显著提高
3. C. 发酵罐传热效率大幅增强
4. D. 泡沫产生量明显减少

30在发酵罐实罐灭菌操作中，灭菌结束后进行降温冷却时，正确的操作顺序是

1. A. 先关排气阀再通冷却水
2. B. 先通冷却水再关排气阀
3. C. 同时关闭排气阀和通入冷却水
4. D. 先开大排气阀再通冷却水

31在青霉素发酵生产中，发酵液经板框过滤除去菌丝体后，滤液下一步通常采用何种方法进行初步浓缩和纯化

1. A. 溶剂萃取法
2. B. 离子交换法
3. C. 凝胶过滤法
4. D. 冷冻干燥法

32在冻干粉针剂生产中，药液灌装后进入冻干机，预冻阶段需要将药液温度降至共晶点以下，其主要目的是

1. A. 使药液完全冻结形成固体骨架便于升华
2. B. 使药液中的水分快速蒸发减少能耗
3. C. 使药液中的微生物被低温杀灭
4. D. 使药液中的蛋白质发生沉淀便于成型

33采用有机溶剂沉淀法从发酵滤液中回收蛋白质类产品，操作温度一般控制在较低范围，主要目的是

1. A. 降低蛋白质变性速率并减少溶剂挥发损失
2. B. 提高溶剂对杂蛋白的溶解能力
3. C. 增加目标蛋白在溶剂中的溶解度
4. D. 使溶剂与水形成共沸便于回收

34发酵罐实罐灭菌结束后，操作工按规程先通入无菌空气保压再降温，这一操作的主要目的是什么

1. A. 防止罐内形成负压吸入外界带菌空气
2. B. 加快罐体降温缩短发酵准备时间
3. C. 提高罐内溶解氧利于接种后菌体生长
4. D. 避免培养基中还原性物质被氧化

35在结晶工序中，为获得较大且均匀的晶体，操作上通常采取的方式是

1. A. 快速降温并剧烈搅拌使过饱和度骤增
2. B. 缓慢降温并控制搅拌转速使过饱和度平稳
3. C. 将溶液浓缩至过饱和后立即快速冷却
4. D. 加入大量晶种并快速搅拌维持高过饱和度

36在离子交换法纯化某碱性多肽时，操作工用pH 6.0的缓冲液上样，目标多肽带正电荷，应选用哪种离子交换介质

1. A. 弱酸性阳离子交换树脂
2. B. 强碱性阴离子交换树脂
3. C. 弱碱性阴离子交换树脂
4. D. 强酸性阳离子交换树脂

37某发酵批次的效价明显低于历史水平，操作工核查发现种子罐移种时菌体浓度偏低，下一步最合理的做法是

1. A. 延长种子罐培养时间待菌体浓度达标再移种
2. B. 直接加大发酵罐接种量弥补
3. C. 提高发酵罐初始温度促进生长
4. D. 向发酵罐补加氮源刺激生长

38用盐析法初步分离发酵液中的目标蛋白时，通常采用硫酸铵分级沉淀，其原理是

1. A. 高盐浓度破坏蛋白水化膜并中和表面电荷
2. B. 高盐浓度使蛋白分子间形成共价交联
3. C. 高盐浓度降低了溶液介电常数使蛋白变性
4. D. 高盐浓度使蛋白的等电点向酸性方向移动

39在抗生素发酵过程中，操作工发现发酵液pH持续偏低且菌体浓度增长缓慢，镜检发现菌丝断裂增多，此时最应优先排查的参数是

1. A. 发酵罐搅拌转速与剪切力是否过高
2. B. 培养基中磷酸盐缓冲能力是否足够
3. C. 种子罐接种时的种龄是否偏年轻
4. D. 发酵尾气中二氧化碳含量是否偏低

40某操作工在结晶工序中发现晶体颗粒过于细小，母液黏度偏高，下列调整措施中最可能改善晶体粒度的是

1. A. 适当降低降温速率并缓慢搅拌
2. B. 提高搅拌转速使晶体充分碰撞
3. C. 快速降温使溶液迅速达到过饱和
4. D. 减少晶种加入量并延长养晶时间

41某批硫酸铵盐析沉淀后的蛋白质沉淀物需要脱盐，下列方法中适合实验室小量样品且能保持蛋白质活性的脱盐方式是

1. A. 透析袋对流水透析后再对缓冲液透析
2. B. 加热蒸发浓缩后冷却结晶除盐
3. C. 加入硫酸铵至饱和后离心取沉淀
4. D. 用强酸型阳离子交换柱吸附脱盐

42在生化药品生产中使用超滤膜包进行浓缩时，若发现膜通量明显下降且跨膜压差升高，最可能的原因是

1. A. 料液浓度过低导致膜面剪切力不足
2. B. 膜面浓差极化或凝胶层形成
3. C. 操作温度过低使料液黏度增大
4. D. 循环流速过快导致膜面冲刷过度

43某发酵车间在对种子罐进行实消（实罐灭菌）时，操作工先夹套通蒸汽升温至90℃再直接通入罐内蒸汽，此操作的主要目的是？

1. A. 防止罐内物料因温差过大产生对流死角
2. B. 提高夹套蒸汽压力以缩短灭菌时间
3. C. 使培养基中的淀粉提前糊化
4. D. 让耐热芽孢提前萌发便于杀灭

44某批次发酵液在提取前需进行固液分离，若目标产物为胞外酶且菌体较易沉降，最适宜采用的分离方式是

1. A. 高速管式离心机连续离心
2. B. 板框压滤机恒压过滤
3. C. 碟片式离心机间歇排渣
4. D. 错流微滤膜组件循环浓缩

45在结晶工序中，为获得较大且均匀的晶体，通常采取的操作是

1. A. 快速降温并剧烈搅拌
2. B. 缓慢降温并控制过饱和度
3. C. 加入大量晶种后立即降温
4. D. 提高溶液黏度后快速搅拌

46离子交换法提取氨基酸时，上柱料液流速通常控制在每小时多少倍树脂床体积

1. A. 0.5～1倍
2. B. 2～4倍
3. C. 6～8倍
4. D. 10～12倍

47在酶制剂盐析沉淀工序中，向酶液中缓慢加入硫酸铵并搅拌，其主要作用是

1. A. 降低酶蛋白溶解度使其沉淀
2. B. 提高酶蛋白溶解度便于过滤
3. C. 使酶蛋白变性失活
4. D. 调节酶液pH至等电点

48在基因工程菌发酵中，诱导剂IPTG加入的时间通常选择在

1. A. 接种后立即加入以缩短表达周期
2. B. 菌体生长进入对数中期且密度适宜时
3. C. 菌体生长进入稳定期后加入
4. D. 发酵结束前加入以提高表达量

49在蛋白质盐析过程中，硫酸铵加入方式对结果影响较大，正确做法是

1. A. 一次性快速加入固体硫酸铵并剧烈搅拌
2. B. 缓慢加入固体硫酸铵并温和搅拌
3. C. 一次性加入饱和硫酸铵溶液并静置
4. D. 快速加入饱和硫酸铵溶液并加热

50在蛋白质盐析沉淀操作中，加入硫酸铵时需要在低温下缓慢搅拌并分批加入，其主要目的是

1. A. 防止局部盐浓度过高导致目标蛋白变性
2. B. 使硫酸铵溶解更加充分
3. C. 提高盐析沉淀的收率至最高
4. D. 促进杂蛋白优先沉淀去除